透析胎牛血清是否需要做滅活處理?
透析胎牛血清進(jìn)行培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),除了血清還需要添加基礎(chǔ)培養(yǎng)基,混合成為*培養(yǎng)基,基礎(chǔ)培養(yǎng)基是成分確定且知其確切含量的,可以補(bǔ)充血清中缺乏的營(yíng)養(yǎng)元素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基一般含有氨基酸、無(wú)機(jī)鹽、維生素、含碳物質(zhì),蛋白和其他營(yíng)養(yǎng)元素,每種成分對(duì)于細(xì)胞存活、代謝等功能都有不同影響,不同細(xì)胞系需要的成分含量也不同,因此市面上會(huì)存在各類培養(yǎng)基配方,如DMEM,RPMI-1640,M-199,MEM等,基礎(chǔ)培養(yǎng)基也需要根據(jù)自己培養(yǎng)的細(xì)胞種類進(jìn)行更合適的選擇。
自行配制基礎(chǔ)培養(yǎng)基時(shí),需要注意是否需另外添加營(yíng)養(yǎng)物或必需物至培養(yǎng)基中(如:碳酸氫鈉)并調(diào)整pH值。使用不適合的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞,細(xì)胞仍可生長(zhǎng)但特性會(huì)改變。培養(yǎng)基中常用的酚紅(pH指示劑)本身有微弱雌激素作用,會(huì)刺激具有雌激素受器的細(xì)胞生長(zhǎng)。
透析胎牛血清是在對(duì)懷孕八個(gè)月的母牛直接進(jìn)行心臟穿刺取血得出的血清,而小牛血清是在小牛出生后一天之內(nèi)通過(guò)靜脈采血所得到的血清。這兩種采集方式是有著根本區(qū)別的,通過(guò)采集的方式便可以得知胎牛血清對(duì)相關(guān)的胎牛質(zhì)量要求更高,因此所提取得血清材質(zhì)效果更好對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的夠提供更穩(wěn)定的性能。在胎牛血清和小牛血清的提取中所需要的工藝和成本大有不同,因而制作而成的胎牛血清與小牛血清之間的價(jià)格也存在著較大的差異。
透析胎牛血清是否需要做滅活處理?這取決于您的應(yīng)用。
滅活過(guò)程中,會(huì)導(dǎo)致血清中某些成分被破壞,如氨基酸,維生素,生長(zhǎng)因子等。所以只有在您的實(shí)驗(yàn)對(duì)血清有特殊要求時(shí),才會(huì)考慮對(duì)血清進(jìn)行滅活處理。如您的實(shí)驗(yàn)對(duì)血清中的某種組分敏感,需要去除該組分。常見(jiàn)的情況是需要去除血清中的補(bǔ)體蛋白,因?yàn)檠a(bǔ)體在機(jī)體中參與細(xì)胞殺傷,巨噬細(xì)胞和淋巴細(xì)胞活化,肥大細(xì)胞和血小板組胺釋放,平滑肌收縮等過(guò)程,所以一般在免疫學(xué)相關(guān)研究中及肌細(xì)胞和干細(xì)胞的培養(yǎng)過(guò)程中需要對(duì)血清進(jìn)行滅活處理。